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采集血培养标本及运送流程
将新鲜离体的血液标本接种于营养培养基上,在一定温度、湿度等条件下,使对营养要求较高的细菌生长繁殖并对其进行鉴别,从而确定病原菌的一种人工培养法。下面是我为大家带来的采集血培养标本及运送流程的知识,欢迎阅读。
一.采集方法
1.培养瓶消毒程序:消毒培养瓶橡皮塞,待干燥后使用。
2.皮肤消毒程序:用消毒液从穿刺点向外画圈消毒,至消毒区域直径达5cm以上,待消毒液挥发干燥后采血。
3.静脉穿刺和培养瓶接种程序:用10ml注射器无菌穿刺取血后,排尽针头内空气,勿换针头(如果行第二次穿刺或用头皮针取血时,应换针头),采血后直接注入血培养瓶,先注5ml于厌氧培养瓶,并注意避免注入空气,后注其它培养瓶,轻轻混匀以防血液凝固或严格按厂商推荐的方法采血。
二.注意事项
1.血液标本采集后应立即送检,不能及时送检者应置室温暂存,勿放冰箱。检验单需注明抗菌药物(特别是磺胺、青霉素)使用情况,采集时间和部位(如左臂等),可疑的诊断。
2.采血部位:通常为肘静脉,疑为细菌心内膜炎时以肘动脉或股动脉采血为宜,切忌在静滴抗菌药物的静脉处采血。对于成人患者,每次发热时应该分别在两个部位采集血标本以帮助区分是病原菌还是污染菌。在不同部位取血,2次分离出同样菌种才能确定是病原菌。不应从留置静脉或动脉导管取血,因为导管易被固有菌群污染。
3.采血时机:在患者发热期间越早越好,最好在抗菌治疗前,以正在发冷发热前半个小时为宜或在停用抗生素24小时后。
4.采血次数及间隔:对需马上做抗菌治疗的急性发热性疾病(如脑膜炎、细菌性肺炎)或需紧急手术的患者,如(急性骨髓炎、化脓性关节炎等),应立即从两臂分别取2份标本。对感染性心内膜炎患者,在24h内取血3次,每次间隔不少于30min;必要时次日再做血培养两次。对发热原因不明者两次抽血间隔60min;必要时于24~48小时后再抽血2次。因为1次血培养不足以说明问题,且会遗漏阳性结果。国外有人统计1次血培养可检出菌血症的80%,2次检出90%,3次检出99%。国内统计17家医院1次血培养阳性率10.8%,18家医院2次以上血培养阳性率14.8%
5.采血量:成人菌血症或败血症的血液中含菌量较少,平均1~3ml血液中仅有1个细菌。所以采血量一定要足够。以培养基与血液之比10:1为宜,以稀释血液中的抗生素、抗体等杀菌物质。采血量过少会明显降低阳性率。成人每次每培养瓶采血5ml(含50ml培养基),婴幼儿每次每培养瓶采血2ml(含20ml培养基)
6.将血注入培养基前不需要更换针头,用无菌干棉球按压瓶塞,并尽可能避免血培养瓶橡皮塞上的残留消毒液影响结果。
7.每日每例采血至少两次,间隔0.5~1h。
三.结果判断
1.健康人体的血液是无菌的。
2.通常血培养分离的细菌或真菌可认为是血液感染的病原体。
3.大多数的菌血症是间歇性的,往往需要以多次血培养阳性证实。如为表皮葡萄球菌、类白喉棒状杆菌等皮肤常居菌,则连续两次培养为同种细菌方可确定。
4.血液中常见细菌为金**葡萄球菌、表皮葡萄球菌、A群、B群链球菌、肺炎链球菌、肠球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌等。
四.临床微生物标本送检的.注意事项
1.所有标本采集后都应立即送往实验室,最好在2小时内。如果不能及时送检,置于室温环境。
2.送检标本应注明来源、检验目的和采样时间,使实验室能正确选用相应的培养基和适宜的培养环境。
3.厌氧培养标本需保持厌氧状态运送:使用专用运送培养基或用针筒抽取标本后排尽空气,在针头上置无菌橡皮塞后运送。
4.最佳的临床标本送检,包括厌氧菌培养标本,首先取决于所获取标本的量。量少的标本要在采集后的15-30分钟内送检。
5.送检期间要予以安全防护:
①放标本的容器必须防漏,禁止将渗漏的标本送往实验室。
②严禁将带有裸露针头的注射器送往实验室。
;如何正确采集血培养标本
二.采血时机
1.尽可能在抗菌药物使用前;
2.对已经使用抗菌药物的病人,最好在下次用药前采集;
3.寒战和发热初起时采血可提高培养阳性率;
4.怀疑血流感染时应尽早采血,不要强调体温超过39℃才抽血,而错过时机。
三、采集方法
1.手卫生:洗手或手消毒。
2.准备血培养瓶:根据检验申请单,选择合适的血培养瓶,血培养瓶外观和种类参照各公司提供的说明书,检查血培养瓶有无破损、保质期等,用75%酒精消毒血培养瓶塞,作用60s,待干。
3.皮肤消毒:按常规消毒穿刺部位皮肤(用蘸有消毒液的棉签,以穿刺点为中心向外螺旋式消毒穿刺部位皮肤两遍,同时旋转棉签,保证穿刺点及周围皮肤无菌状态,防止皮肤寄生菌或环境引起的污染),消毒范围为8×10cm,待干。
4.持穿刺针按常规方法刺入静脉,另一头刺入相应血培养瓶内,利用瓶内真空抽取血标本,如用注射器无菌穿刺取血后,勿换针头直接注入血培养瓶。
5.建议每套血培养同时接种至需氧瓶和厌氧瓶,有利于微需氧菌和厌氧菌的检出。当厌氧菌感染不能除外的病人,如腹部手术合并感染的病人,必须同时做厌氧菌血培养。如果不能满足推荐的采血量时,应首先满足需氧瓶;婴幼儿血培养一般只抽一瓶需氧瓶进行培养,无需常规做厌氧瓶。
6.血液注入血培养瓶后轻摇瓶子以防血液凝固。
四.标本运送
1.已采集的标本应视为潜在性生物危险品,均应置于防漏、防渗、相对密封的容器中收集、
存储与转运。
2.血培养采样结束后应由专人立即送至微生物实验室核收,一般不得超过2小时;如因某种原因不能及时送检,应将已采集好的血液培养瓶放在室温,切勿放入冰箱内冷藏或冷冻。
五.注意事项
1.标本采集和运送均应在防止污染的原则一下认真进行。
2.填写申请单时,一定要标明病人相关信息、每瓶标本采血时间、来源和抗菌药物使用情况。
3.怀疑血流感染(BSI)时,独立的外周静脉无菌采集2套血培养,每套不少于10ml(1套血培养定义:是指一次静脉采血,不论被接种在1个还是多个血培养瓶内),最好为20ml血液,每瓶不少于5ml,婴幼儿采血量一般2ml~5ml(每瓶不少于2ml),各自做好标记。
.4.当怀疑骨髓炎、脑膜炎、肺炎和肾盂肾炎合并菌血症时,在抗菌药物使用前从不同部位抽取2套血培养,两个来源的采血时间必须接近(建议≤5分钟),各自做好标记。
5.对不明原因的发热、亚急性心内膜炎,由三个?同的部位抽取3套血培养,每套间隔时间≥1小时,当培养24~48h后若为阴性,则继续采集2套血培养。
6.导管相关血流感染(CR-BSI):
(1).希望保留深静脉导管者
至少2套血培养,其中至少一套来自外周静脉,另一套从导管采集,两个来源的采血时间必须接近(建议≤5分钟),并各自做好标记。
(2).决定拔除深静脉导管者
从独立的2个外周静脉部位,无菌采集2套血培养,同时无菌下取出导管并剪下5cm导管末梢送实验室(实验室采用Maki 半定量平板滚动培养)。
(3).在采血2-5天内,无需重复做血培养,细菌性心内膜炎和金**葡萄球菌菌血症除外。
什么情况下应该采集血培养?
采集血培养标本是有指征的,当患者体温超过38℃或低于36℃,患者寒战,查血常规白细胞计数大于10×109 /L,特别有“核左移”未成熟或杆状核白细胞时,粒细胞减少、成熟的.多核白细胞<1×109 /L,血小板减少,患者出现皮肤黏膜出血、昏迷、休克或多器官衰竭,C反应蛋白升高,降钙素原升高等情况均应采集血培养标本。当然不能除外感染,需明确病原菌时,也要采集血培养。
采集血培养标本有最佳时间吗?
血培养标本是有最佳采集时间的,尽可能在患者寒战开始时、高热高峰前30-60分钟内采血,另外在患者接受抗生素治疗前采血,但如果患者已经应用抗菌药物进行治疗,应在下一次用药之前取血。
为什么使用需氧和厌氧瓶并采集两套呢?
需氧瓶、厌氧瓶标本同时取有助于提高阳性率,细菌包括需氧菌、厌氧菌和兼性厌氧菌。兼性厌氧菌不论在有氧或无氧环境中都能生长,但以无氧时生长较好,大多数病原菌属于此类。因此,建议每套血培养同时接种至需氧瓶和厌氧瓶,有利于微需氧菌和厌氧菌的检出,但如果不能满足推荐的采血量时,应首先满足需氧瓶。成人患者一套血培养标本需取血20ml,需氧瓶、厌氧瓶各10ml,一套标本的检测灵敏度是73.2%,两套标本的检测灵敏度是93.9%,可见采集两套标本可以明显提高检测灵敏度,所以取两套标本还是很有必要的。值得注意的是,如果取两套标本要分别在两个穿刺点采血。
怎样规范的采集血培养标本呢?
第一步:手卫生。用皂液和流动水或含酒精的快速手消毒剂进行手卫生。
第二步:消毒瓶塞。用酒精纱布消毒培养瓶塞,充分待干。
第三步:皮肤消毒。范围直径不小于5厘米,消毒后不可再用手接触。
① 先用70%-80%乙醇消毒不少于30秒。
②再用1%-2%碘酊消毒30秒或10%碘伏消毒60秒。
③ 再用70%-80%乙醇脱碘。
注意:对碘过敏的患者用70%-80%乙醇消毒2遍作用时间各3分钟,等酒精挥发干燥后采血。
第四步:采血。取血后不要更换针头直接注入血培养瓶。如果血量充足:先注厌氧瓶,后注需氧瓶,如果血量不足:优先注入需氧瓶,剩余注入厌氧瓶,因为真菌、绿脓杆菌、窄食单胞菌多长在需氧瓶内。
第五步:混匀。血培养标本接种到培养瓶后,轻轻颠倒混匀以防血液凝固,不要大力摇晃。在每个培养瓶上分别标记采血部位和采血时间,注明是导管血还是外周血。
第六步:同法选择对侧穿刺部位采集第二套标本。
第七部:送检。血培养标本尽快送到实验室,任何的时间延误都会延迟或阻止检测细菌的生长。
注意:标本应从静脉取血,不宜从静脉导管或静脉留置口取血。若导管设施取血,不要弃去初段血,不用抗凝剂冲洗,必须同时静脉取血,以求对比和解释。不推荐使用真空采血针(蝴蝶针)将静脉血直接入瓶。不主张换针头入瓶。有血的培养瓶不可放入冰箱和冻箱保存。
未使用的血培养瓶在室温保存,被接种后不得冷藏或冷冻。
采集血培养标本需要严格无菌操作,但采集、送检、接种过程等仍然有可能有不可避免的污染,会不会有一些污染菌呢?
在多次血培养中单次培养下列细菌阳性,可认为是污染菌,包括凝固酶阴性葡萄球菌、棒状杆菌、微球菌、丙酸杆菌、芽孢杆菌。如多次血培养多次阳性,可能为条件致病菌,需要结合临床进行分析。
对于成人及青少年患者采集血培养标本的总体建议:
1. 血流感染、脑膜炎、骨髓炎、关节炎、肺炎患者,在治疗前于不同部位采血2套或3套,同一部位需间隔30min-1小时,每套20ml,需氧、厌氧各10ml。
2. 急性感染性心内膜炎患者,治疗前30分钟内采血3套。
3. 亚急性感染性心内膜炎患者,治疗前第一天采血2-3套,间隔30-60分钟,如结果为阴性,第二天和第三天再抽取血培养,24小时内采血不超过4套。
4. 导管相关性血流感染患者,采集2套血培养,1套从怀疑存在感染的导管获得,一套从外周获得,两套血同时采集。可先取外周血,5分钟内完成对导管血的采集。拔除导管时送导管尖端培养,并采集血培养标本。
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